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IHC染色不均匀分析

 更新时间:2024-11-22    点击量:149

上次我们分享了IHC未染色或无信号的原因分析,这次让我们来看看IHC染色不均匀是为什么吧。

一、组织切片制备

解释:组织切片薄厚不均匀

→建议:更换刀片

二、组织固定

1.解释:酒精固定不足会产生伪影;

→建议:延长固定时间;尝试不同的固定液

2.解释:固定延迟导致抗原扩散;

建议:立即固定组织;可以考虑使用交联固定剂

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三、脱蜡

解释:脱蜡不wan全

→建议:使用新鲜的二甲苯

四、抗体兼容性

解释:一抗可能结合其他抗原上的表位

→建议:从多抗切换至单抗;尝试不同的单抗

五、透化

解释:细胞膜被破坏,膜蛋白丢失

→建议:使用低浓度或更温和(Tween-20)的透化试剂

六、组织切片状态

解释:组织切片未保持湿润

→建议:在染色阶段避免组织切片干燥

 

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